Difference between revisions of "Gscope Clonage"
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Revision as of 17:47, 23 January 2007
Gscope Clonage
- et une application spécifique de Gscope qui permet de créer, étudier, stocker et gérer toutes les information sur la ou les protéines dont vous rêvez de faire la structure tridimensionnelle.
- fait toutes les analyses possibles de vos séquences
- dessine les oligos pour le clonage, commande les oligos; crée le produit PCR, fait les recombinaisons pDONR, pDEST et le café.
Contents
Création de la séquence
- Pour cela il faut :
- la séquence complète en nucléotides de ATG jusqu'au stop (TAA, TGA, TAG) s'il est connu.
- un nom de gène (par ex. hsDRH4-A) contenant uniquement les caractères a-zA-Z0-9 et - Donc pas de blancs, de _, de +, d'apostrophes ni de parenthèses, etc.
- une définition du style "Homo sapiens DNA repair helicase variant 4 machin A DRH (EC 3.6.1.-)."
- si possible une référence de la protéine dans une base de données de séquences (Uniprot, RefSeq, GeneBank, PDB, etc.)
Analyse de séquence
... qui vous aide à définir les domaines de la protéines
Commande d'oligos
- Il suffit de créer un fichier contenant les lignes suivantes (c'est un exemple !)
AttB1_Thrombin_NdeI_hsDRH4-A-2-678_STOP_BamHI_AttB2 AttB1_Thrombin_NdeI_hsDRH4-A-2-443_STOP_BamHI_AttB2 AttB1_Thrombin_NdeI_hsDRH4-A-58-443_STOP_BamHI_AttB2
- mais attention ...
- écrire les signaux correctement, avec majuscule et miniscules
- les _ séparent les signaux entre eux et avec la prot.
- le - de hsDRH4-A fait parti du nom de gène, les autres séparent les bornes des domaines.
- gscope OligAuto fait tout le reste en automatique.
Verification de séquence
Serait-ce un LIMS ?
Et bien sûr Gscope garde tout ça en mémoire et vous l'affiche à la demande.
setgscope ProGS gscope
A+ Raymond
